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  2. immunochemisch Digoxinkonzentration Medikamentenextrakt nachgewiesen gleichen Methode können Digoxinmenge Serum nachwseisen Besc
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Sie haben immunochemisch die Digoxinkonzentration in einem Medikamentenextrakt nachgewiesen.

Mit der gleichen Methode können Sie auch die Digoxinmenge im Serum nachweisen.

Beschreiben Sie die Methode mit den mit den entsprechenden Komponenten um Digoxin in Serum nachzuweisen.

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    kompetitiver Immunoessay (Enzymgekoppelter Immunadsorptionstest, EIA): Hierbei wird das zu bestimmende Antigen und ein Peroxidase-konjugiertes Antigen an Antikörper gebunden. Die beiden konkurrieren um die freien Bindungsplätze der Antikörper und eine Messung der Extinktion lässt reziprok zum Messwert einen Rückschluss auf den Gehalt des zu messenden Antigens zu.

    • wenig Analyt = fast alle Antikörperbindestellen werden von markiertem Kompetitor besetzt = starke Farbreaktion
    • viel Analyt = schwache Farbreaktion
  • ✓ ✗

    Durchführung:

    1. Beschichten: "coaten" der Mikrotiter-Module mit Fab-Fragmenten des Schaf-anti-Digoxigenin-Antikörper (über Nacht im Kühlschrank inkubieren)
    2. Antikörperlösung verwerfen
    3. Blockieren: Blockmedium (für 90 Minuten bei 36°C inkubieren)
    4. Blockmedium verwerfen
    5. Waschen: Phosphatpuffer (pH 6,8); Waschpuffer sofort nach dem Befüllen der Tröge verwerfen
    6. Kompetitive Antigenbindung: 10 µL digoxinhaltige Serum-Probe in Mikrotiter-Module & sofort 100 µL Peroxidase-konjugierte Digoxinlösung dazugeben (25 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren)
    7. Inhalt der Mikrotiter-Module verwerfen
    8. Waschen: Phosphatpuffer (pH 6,8, 20 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren)
    9. Substrat-Chromogen-Entwicklung: 100 µL Chromogen-Lösung, (20 bis 30 Minuten bei Raumtemperatur im Dunkeln)
    10. Messung: ELISA-Reader bei 405 nm Extinktionswellenlänge
#gemeinsamgegencorona
Bleibt gesund!
Lösungshinweise & Bemerkungen des Autors

Der polyklonale Antikörper vom Schaf ist spezifisch gegen Digoxigenin und Digoxin

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Klausurvorbereitung Pharmazeutische Biologie III (Biologische und phytochemische Untersuchungen) Pharmazie
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100 188 Aufgaben Minuten 174 Aufgaben starke 159 Aufgaben hierbei 100 Aufgaben Beschreiben 89 Aufgaben gebunden 86 Aufgaben gleichen 84 Aufgaben schwache 77 Aufgaben wenig 60 Aufgaben nachgewiesen 59 Aufgaben Messung 52 Aufgaben sofort 49 Aufgaben entsprechenden 48 Aufgaben Methode 42 Aufgaben Serum 37 Aufgaben nachweisen 36 Aufgaben Antigen 33 Aufgaben freien 30 Aufgaben Digoxin 29 Aufgaben Komponenten 29 Aufgaben Nacht 28 Aufgaben Raumtemperatur 25 Aufgaben konkurrieren 20 Aufgaben Inhalt 20 Aufgaben spezifisch 19 Aufgaben Gehalt 19 Aufgaben kompetitiver 16 Aufgaben besetzt 11 Aufgaben Coaten 10 Aufgaben Messwert 9 Aufgaben 405 8 Aufgaben Peroxidase-konjugierte 7 Aufgaben inkubieren 7 Aufgaben Blockmedium 7 Aufgaben Antigens 6 Aufgaben Schaf 6 Aufgaben Analyt 6 Aufgaben ELISA-Reader 6 Aufgaben markiertem 5 Aufgaben Phosphatpuffer 5 Aufgaben Farbreaktion 4 Aufgaben messenden 4 Aufgaben Kompetitor 4 Aufgaben EIA 4 Aufgaben Immunadsorptionstest 4 Aufgaben Enzymgekoppelter 4 Aufgaben dunkeln 4 Aufgaben Extinktion 4 Aufgaben bestimmende 4 Aufgaben Peroxidase-konjugiertem 3 Aufgaben Antigenbindung 3 Aufgaben Waschpuffer 3 Aufgaben Polyklonale 3 Aufgaben Immunoessay 3 Aufgaben reziprok 3 Aufgaben Fab-Fragmenten 3 Aufgaben Mikrotiter-Module 3 Aufgaben beschichten 3 Aufgaben nachzuweisen 3 Aufgaben Substrat-Chromogen-Entwicklung 3 Aufgaben Digoxigenin 2 Aufgaben immunochemisch 2 Aufgaben Digoxinkonzentration 2 Aufgaben Besc 1 Aufgaben nachwseisen 1 Aufgaben Digoxinmenge 1 Aufgaben Medikamentenextrakt 1 Aufgaben digoxinhaltige 1 Aufgaben
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